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病毒轉(zhuǎn)染是指將外源病毒導(dǎo)入真核細胞的技術(shù)，用病毒將帶有目的基因的載體整合到細胞的基因組中，以達到長期穩(wěn)定表達目的基因的目的。隨著分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。那么病毒轉(zhuǎn)染實驗有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、病毒安全性問題病毒本身具有一定的危險性，需要在符合生物安全實驗室標準的條件下進行實驗，并遵守相關(guān)的實驗室安全操作規(guī)范。病毒操作時最好使用生物安全柜。如果使用普通超凈工作臺操作病毒，請不要打開排風(fēng)扇。病毒操作時...

電轉(zhuǎn)，也稱電穿孔法，是通過脈沖電流在細胞膜上打孔，將外源分子（DNA、RNA、mRNA等）導(dǎo)入真核細胞內(nèi)，來改變細胞的特性，從而達到改造細胞的目的，是實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究的重要工具。那么該如何提高電轉(zhuǎn)效率呢？讓我們一起來看看吧！一、細胞收集時：1)在消化貼壁細胞時，一定要注意終止胰酶反應(yīng)，防止過度消化；最好使用專業(yè)的胰酶中和劑；2)在進行細胞離心時，使用低轉(zhuǎn)速長時間離心，提升細胞的存活率；3)選擇合適狀態(tài)的細胞，一般原代細胞可以傳1-2次后使用；盡量挑選迭代次數(shù)少...

細胞培養(yǎng)有兩種基本方式，一種是人工基質(zhì)上的單層細胞（貼壁培養(yǎng)），另一種是在培養(yǎng)基中自由漂浮（懸浮培養(yǎng)）。那么你知道貼壁細胞培養(yǎng)和懸浮細胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么嗎？讓我們一起來看看吧！來自脊椎動物的大多數(shù)細胞，除了造血細胞系和少數(shù)其他細胞系，都是貼壁依賴性的，必須在經(jīng)過專門處理以允許細胞粘附和擴散的合適基質(zhì)上培養(yǎng)。然而，許多細胞系也適用于懸浮培養(yǎng)。同樣，大多數(shù)市售昆蟲細胞系在貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng)中生長良好。懸浮培養(yǎng)的細胞可以保存在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶中，但隨著培養(yǎng)體積與表面積的增加...

你知道什么是原代細胞培養(yǎng)，和細胞生長曲線嗎？，讓我們一起來看看吧！一、原代細胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的首ci培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時間短，遺傳性狀和體內(nèi)細胞相似，適于做細胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。最chang用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。二、細胞生長曲線細胞生長曲線是測定細...

熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應(yīng)體系中加入熒光基團，通過對擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！以探針法熒光定量PCR為例：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。開始時，探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收，檢測不到熒光信號...